Исследователи из Стэнфорда представили метод интерферометрической сканирующей микроскопии (iISM). Он позволяет визуализировать внутриклеточные структуры без обязательной флуоресцентной маркировки, сочетая интерферометрическое рассеяние света и сканирующую микроскопию.
Принцип формирования изображения
В iISM изображение строится за счёт интерференции света, рассеянного образцом, с опорным отражённым полем. Камера фиксирует серию измерений, а последующая обработка и перераспределение пикселей повышают контраст и эффективное поперечное разрешение. Это не простое цифровое увеличение и не стереозрение: метод использует волновые свойства света и вычислительную обработку для извлечения более детальной информации о распределении рассеяния внутри клетки.
В условиях эксперимента поперечное разрешение составило порядка 120 нанометров. При небольшой мощности освещения в живых клетках удалось визуализировать митохондрии, элементы эндоплазматической сети и движение везикул, то есть получать динамические сведения о структурной организации.
Преимущества и ограничения безметочного режима
Отсутствие флуоресцентных меток даёт более естественный контекст и позволяет наблюдать динамику структур без влияния красителей. В то же время безметочный канал не обеспечивает молекулярной избирательности: по одному контрасту рассеяния нельзя достоверно отнести наблюдаемые объекты к конкретным белкам или комплексам. Поэтому iISM рассматривается как дополнение к флуоресцентным методам, а не их замена.
Авторы отмечают, что метод демонстрирует возможности прибора и подхода, но не утверждают, что все клеточные структуры идентифицируются автономно без дополнительных методов, и не заявляют о готовой диагностической или лечебной применимости.
